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核酸提取试剂盒(磁珠法)(Ex-DNA全血DNAⅡ代)

作者:上海岚兴生物科技有限公司 2016-01-11T11:37 (访问量:2729)

 核酸提取试剂盒(磁珠法)(Ex-DNA全血DNAⅡ代)

【产品名称】 通用名称:核酸提取试剂盒(磁珠法)(Ex-DNA全血DNAⅡ代)
【规 格】 50次/盒
【预期用途】 可从全血样品中快速提取基因组DNA,实现平行样本的高通量处理。
提取的核酸纯度高,量大,可广泛应用于基因组学研究、疾病检测及法医鉴定等
领域。
【检测原理】核酸提取过程中,利用磁珠吸附原理,通过特制的磁棒吸附、转移
和释放磁珠,实现磁珠/核酸的转移,自动完成核酸的提取和纯化。
【试剂盒组成】
1 Magnetic Beads 1.5ml 6 Wash Buffer Ⅱ 6ml
2 Proteinase K 1支(干粉) 7 Wash Buffer Ⅲ 6ml
3 Proteinase K Buffer 1支 8 Wash Buffer Ⅳ 30ml
4 Lysis Buffer 25ml 9 Elution Buffer 5ml
5 Wash Buffer Ⅰ 18ml 10 β-巯基乙醇 0.3ml
【储存条件及有效期】4℃保存。有效期一年。
【适用仪器】 TIANLONG NP968磁珠核酸提取仪及同类仪器
【样本要求】
1. 适用样本类型:全血等; 4℃保存不超过24小时,长期保存需置于-20℃。
【试剂配制】
1. Lysis buffer配制:按Lysis buffer:异丙醇=10:1加入异丙醇(需自
备),再按总体积的1%加入β-巯基乙醇,现配现用。
2. Wash Buffer I配制:Wash Buffer I加入12ml无水乙醇(需自备)充分混匀,即可使用。
3. Wash Buffer II配制:Wash Buffer II加入24ml无水乙醇(需自备)充分混匀,即可使用。
4. Wash BufferⅢ配制:Wash Buffer Ⅲ加入24ml无水乙醇(需自备)充分混匀,即可使用。
5. Proteinase K配制: 每支Proteinase K干粉中加入550 µl Proteinase K Buffer,使其
完全溶解,即可使用。溶解后的溶液于-20℃保存,反复冻融不得超过6次。
【使用方法】
1.手工提取步骤:
1.1 在1.5ml离心管中加入30µl Magnetic Beads 、10µl Proteinase K、500µl Lysis Buffer
(也可将Proteinase K、Lysis Buffer预混,分装使用,现用现配)及200µl 样品,55℃水
浴20分钟。
1.2 将离心管置于磁力架上1分钟,使管内磁珠被吸附,移走管内液体,取下离心管。
1.3 加入600µl Wash Buffer I,使磁珠重悬,利用磁力架吸附磁珠,1分钟后移走管内液体,
取下离心管。
1.4 加入600µl Wash Buffer II,使磁珠重悬,利用磁力架吸附磁珠,1分钟后移走管内液体,
取下离心管。
1.5 加入600µl Wash Buffer Ⅲ,使磁珠重悬,利用磁力架吸附磁珠,1分钟后移走管内液体,
保持离心管在磁力架上。
1.6 加入600µl Wash Buffer Ⅳ,尽量不要吹散磁珠,1分钟后移走管内液体,取下离心管。
1.7 加入50µl~100µl Elution Buffer,使磁珠重悬,55℃水浴5分钟,期间轻轻晃动使DNA从
磁珠上洗脱下来。
1.8 将离心管置于磁力架上1分钟,使磁珠被吸附,将液体转移至新的1.5ml无核酸酶离心管
中,-20℃保存。
2. 自动化仪器提取步骤:
2.1 依下列表格,在96孔板中加入试剂:
1/7 标本混合液 10µl Proteinase K +500µl Lysis Buffer+200µl全血+30µl磁珠
2/8 Wash BufferⅠ 600µl
3/9 Wash BufferⅡ 600µl
4/10 Wash BufferⅢ 600µl
5/11 Wash BufferⅣ 600µl
6/12 Elution Buffer 100µl
2.2 按以下程序运行:
步骤 槽位 名称 等待时间
(min) 混合时间
(min) 磁吸时间
(sec) 混合速度 体积(ul) 温度状态 温度(℃)
1 1 裂解 0 20 90 快 750 裂解加温 65
2 2 洗涤1 0 3 90 中 600 关闭 0
3 3 洗涤2 0 3 90 中 600 洗脱加温 65
4 4 洗涤3 0 2 90 中 600 洗脱加温 65
5 5 洗涤4 0 0 30 中 600 洗脱加温 65
6 6 洗脱 0 5 90 中 100 洗脱加温 65
7 2 弃磁珠 0 1 0 中 600 关闭 0
2.3自动化程序结束后,将第6及第12排的洗脱液转移至干净无核酸酶的离心管中,-20℃保存。
注:若Buffer 中有沉淀,请37℃水浴溶解后使用。操作时,若管壁和管盖有液体,请短暂离心后
再置于磁力架上。

【注意事项】请务必在使用该试剂盒之前阅读此注意事项。

1. 本试剂盒提取靶标为基因组DNA,

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