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『维真生物_腺病毒』什么情况下选用腺病毒载体?

作者:山东维真生物科技有限公司 2021-10-20T16:11 (访问量:4102)

腺病毒载体能感染分裂细胞和非分裂细胞,适用于体内和体外基因传递,转染效率高,对外源基因瞬时表达量高。但相对于其他病毒载体系统,腺病毒载体在靶细胞中具有相对较高的免疫原性。那么什么情况下,可以优先考虑腺病毒载体

1.目的基因较大

腺病毒较慢病毒和腺相关病毒一个很大的优势在于,载体容量大可以插入7.5kb以下的基因片段,因此,当待研究的外源基因较大时,可以考虑使用腺病毒载体。

2.需缩短实验周期

腺病毒感染效率高,在理想感染条件下,在很多细胞株中的效率可以达到99%,可直接进行后续实验,节约经济成本和时间成本。

3.目的细胞较难感染,且后续实验不需要建立稳定细胞株

原代细胞较传代细胞等细胞系难转染,而腺病毒能感染几乎所有的细胞类型相较于慢病毒和腺相关病毒更适合原代细胞的感染。对于那些慢病毒感染难度较大,且不需要筛选稳定细胞株时,可以选择滴度更高的腺病毒,不仅可以提高感染效率,也能节约成本。

4.需进行动物实验

用于动物实验的病毒需具有较高的滴度,才能达到使用小体积注射的目的。目前,慢病毒能达到的较高的有效滴度通常在108TU/mL左右,较腺病毒和腺相关病毒更低,而大体积的注射量对于动物是有害的。在这种情况下可以根据实验目的和感染部位选择腺病毒,因为腺病毒的滴度通常可达1011PFU/mL,在应用动物实验时,注射体积量更小。不仅如此,腺病毒可进行扩增纯化,从而避免重新包装,以节约经济成本和时间成本。

合适的病毒载体是进行病毒转导实验的关键,下面是病毒载体选择小技巧,供大家参考:

 

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