重组抗体制备

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服务概述

重组抗体可以通过鼠杂交瘤细胞或人B淋巴细胞或抗原激活的B淋巴细胞提取RNA并进行反转录PCR，然后进行系列基因工程方法得到抗体工程菌。

样品要求

适当保存的鼠杂交瘤细胞，瘤细胞或人B淋巴细胞或抗原激活的B淋巴细胞。

服务流程

1. 从细胞中提取RNA并进行反转录PCR；

2. 应用特有的引物通过PCR方法克隆轻链和重链基因的不同区域(可变区或其中的CDR区)；

3. 将PCR产物连接到载体上；

4. 测序轻链和重链基因不同区域的克隆；

5. 报告测序数据；

6. 将克隆的片段插入特定的表达载体，构成鼠源可变区－人单抗恒定区的嵌和基因，或者用鼠源CDR区置换人单抗骨架中的CDR区；

7. 用PCR检测连接正确性；

8. 转染到适当的宿主菌或哺乳动物细胞；

9. 筛选阳性菌或细胞株并扩增；

10. 重组抗体的表达与纯化。

11. 用ELISA检测抗体特异性；

12. 保存阳性菌株或细胞株。

完成时间

一般6个月左右。

最终产品

    纯化的重组抗体，阳性菌或细胞株，实验报告。

服务费用

根据客户要求不同，价格也不一样，询价。