产品内容：
提取液：液体35mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加10 mL蒸馏水溶解。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加入10 mL提取液，沸水浴中磁力搅拌溶解。
试剂三：液体50ml×1瓶， 4℃保存。
试剂四：液体10mL×1瓶，4℃保存。
标准品：液体1mL×1支，0.25 μ mol/mL标准酪氨酸溶液，4℃保存。
产品说明：
AKP是指在碱性条件下催化蛋白质肽键水解的酶类，属于丝氨酸蛋白酶。此外，该酶还能够水解酯键、酰胺键，具有转酯及转肽的功能。该酶是主要工业用酶之一，广泛应用于制药、丝绸、食品、制革等行业。
在碱性条件下，AKP水解酪蛋白生成酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸生成钨蓝；钨蓝在680nm有特征吸收峰，测定680nm吸光度增加速率，来计算AKP活性。
试验所需自备仪器和样品：
研钵、台式离心机、可见分光光度计、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1.5 mL EP管、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
操作步骤：
一、粗酶液提取：
称约0.1g组织，加入1mL提取液，冰上充分研磨，10000rpm 4℃离心10min，取上清，即粗酶液，置冰上待测。或直接称取0.1g酶制品，加入1mL提取液，置冰上待测。
二、测定：
1.分光光度计预热30min以上，调节波长到680 nm，蒸馏水调零。
2.试剂一、试剂二和试剂三置于30℃水浴保温30min以上。
3.样本测定（在1.5mLEP管中依次加入下列试剂）
试剂名称（μL）
对照管
测定管
空白管
标准管
粗酶液
100
100
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
试剂二
 
200
混匀后40℃水浴保温10min
试剂一
 
200
试剂二
200
 
混匀后10000rpm 4℃离心10min，取上清
上清
200
200
 
 
蒸馏水
 
 
200
 
标准品
 
 
 
200
试剂三
1000
1000
1000
1000
试剂四
200
200
200
200
混匀后40℃水浴保温20min
 
取1mL于1mL玻璃比色皿中，在680nm测定光吸收，分别记为A对照管、A测定管、A空白管、A标准管。
三、碱性蛋白酶活性计算：
（1）按蛋白浓度计算
NP活性单位（U）定义：30℃每毫克蛋白每分钟水解产生1μmol酪氨酸。
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