在蛋白质的线性结构中，N端（氨基末端）不仅是多肽链合成的起点，更是调控蛋白质命运的关键区域。从翻译后修饰到亚细胞定位，从酶活性调节到分子间相互作用，N端序列的微小变化往往牵动着蛋白质功能的全局。蛋白质和肽的N端序列分析，不仅是蛋白质鉴定的基石，更是揭示生命分子动态调控规律的窗口。

蛋白质的N端通常指从氨基端延伸的数十个氨基酸残基。这一区域在进化中展现出独特的保守性，其序列特征与蛋白质的功能实现密切相关。例如，信号肽的N端序列决定了新生肽链能否进入内质网进行加工；某些酶原的N端剪切直接关联其活性状态的转换；而蛋白质降解系统中的泛素化标记也常锚定在特定N端残基上。此外，N端乙酰化、甲酰化等修饰广泛存在于真核生物中，这些化学修饰不仅影响蛋白质的稳定性，还可能作为细胞信号网络的调控开关。因此，N端序列分析不仅是确定蛋白质身份的基础手段，更是探索其功能调控机制的关键切入点。

一、N端序列分析的原理

N端序列分析的核心是通过化学或物理方法逐步降解或识别肽链N端的氨基酸残基，并依次确定其排列顺序。这一过程通常依赖于化学反应或高分辨率的质谱分析，确保氨基酸序列的正确识别。由于蛋白质的N端可能受到翻译后修饰，如乙酰化或甲酰化，这些修饰可能影响传统方法的识别效率，因此不同的分析策略会根据目标蛋白的特性进行选择和优化。

二、N端序列分析的主要方法

蛋白质和肽的N端序列分析主要用于鉴定蛋白质或肽链的起始氨基酸序列，蛋白质和肽的N端序列分析主要依赖于两种技术路径：化学降解法和质谱法。两者各有优势，适用于不同的研究需求。

1、化学降解法

化学降解法是最早发展出的N端测序技术，其代表性方法是Edman降解。该方法利用特定的化学试剂与N端氨基酸反应，使其从多肽链中选择性切割，并进行鉴定。Edman降解具有较高的专一性，可以逐步解析较短序列，并且适用于纯化后的蛋白样本。然而，该方法在处理复杂混合物或N端修饰蛋白时存在局限。此外，由于该方法需要循环进行，测序效率较低，且随着测序循环增加，信号强度衰减，限制了其在较长序列解析中的应用。

2、质谱法

近年来，基于质谱（MS）的N端测序方法逐渐成为主流。通过高分辨率质谱仪，研究人员可以直接分析蛋白或肽段的分子量，结合特定的裂解模式推导N端氨基酸序列。质谱法可避免化学降解带来的时间消耗和试剂影响，特别适用于复杂蛋白混合物的分析。质谱技术的优势在于灵敏度高、通量大，并能够解析带有修饰的N端结构。然而，由于蛋白质N端可能发生多种修饰，数据解析的复杂度较高，需要结合生物信息学工具进行深入分析。

当前蛋白质和肽的N端序列分析已形成多技术联动的复合体系。化学标记法通过特异性修饰N端氨基，可增强目标肽段的电离效率或色谱保留特性，为质谱检测提供分子特征标签。生物信息学工具的进步，使得海量质谱数据得以快速匹配已知序列数据库，同时也能预测未知修饰位点。此外，微流控芯片技术的集成化设计，将样品前处理、酶解、分离等步骤浓缩于微型平台，极大提升了分析效率。这些技术的协同不仅突破了传统方法的灵敏度瓶颈，更拓展了研究的时空维度。例如，时间分辨质谱可捕捉蛋白质加工过程中的瞬时N端变化，空间定位技术则能关联特定亚细胞区室内的N端修饰事件。这种多维解析能力，为揭示蛋白质生命周期中的动态调控网络提供了有力工具。

从Edman降解的化学试剂瓶到现代质谱仪的离子阱，蛋白质和肽的N端序列分析技术不仅支撑着基础研究的深入，更在临床诊断、生物制药等领域展现应用潜力。肿瘤特异性N端肽段作为疾病标志物的探索，抗体药物N端均一性的质控需求，都彰显着该领域的研究价值。在系统生物学时代，N端序列分析将继续作为解码蛋白质功能语言的重要工具，推动生命科学向更精密的分子维度迈进。百泰派克生物科技为广大客户提供蛋白质和肽的N端序列分析服务。我们的“一站式”服务能为您节省时间和精力，帮助您更高效地开展相关研究。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

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