产品信息

产品描述

Hieff Canace^® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase是一种基于Pfu DNA Polymerase改造而成的新一代高保真DNA聚合酶，和Pfu DNA Polymerase相比，Hieff Canace^® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase的性能得到大幅度提升，针对复杂的模板也能快速准确的完成PCR反应。其保真性显著提高，且解决了常规高保真酶无法以dUTP为原料进行聚合反应、无法使用含有dUTP的扩增引物以及无法使用含有dUTP的DNA作为扩增模板等诸多问题。本产品配备了优化后的酶缓冲液，添加了PCR增强组分，使得该酶具有极强的扩增效率和广泛的模板适应性，适合复杂模板的扩增。其扩增产物为平末端。

产品组分

运输和保存方法

冰袋运输。-20 °C保存，有效期1年。

产品应用

使用含dUTP的引物进行高保真文库扩增；

使用含dUTP的模板进行高保真文库扩增；

使用含dUTP的dNTP进行高保真文库扩增。

注意事项

1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 本产品仅作科研用途！

使用方法

Hieff Canace^® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase与常规高保真酶的使用方法略有不同。在使用前，请务必仔细阅读使用说明。

1. 推荐反应体系

所有操作应于冰上进行，2×Canace^® Uracil+ PCR buffer解冻后请充分混匀。体系配置之前请预热PCR仪，各组分添加完成之后用移液器吸打充分混匀并短暂离心至管底，然后置于预热的PCR仪中进行反应。所有组份使用完毕之后及时放回-20 °C保存。

表1. PCR扩增反应体系

【注】：

1) 模板：使用纯化后的高质量DNA模板可以显著提高扩增效率和成功率。

2) dNTPs：反应体系中dNTPs使用终浓度为200 μM。试剂盒中提供的dNTPs中不含dUTP，如特殊情况下需要制备含dUTP的模板，可自行额外添加dUTP至终浓度为400 μM。

3) 聚合酶浓度：在50 μL体系中，推荐使用1 U，可以在0.5-2 U之间进行优化，请勿超过2 U。为了防止聚合酶因3’→5’外切酶活性降解引物，建议将聚合酶在最后一步加到反应体系中。

4) Mg²⁺终浓度：反应体系中Mg²⁺终浓度为2 mM。如有特殊需要，可向我公司咨询，要求提供低Mg²⁺浓度或不含Mg²⁺的buffer。

2．推荐反应程序

表2. PCR扩增反应程序